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关于新冠病毒肺炎流式标本处理注意事项

发布时间:2020/2/11编辑:Ma Liang 人气:2130

 
阿仪网 行业资讯】国家卫健委批准,1月25日发布的《北京协和医院关于“新型冠状病毒感染的肺炎”诊疗建议方案(V2.0)》第二条“2019-nCoV病人的诊疗-诊断标准中提到:对于急性发热对于急性发热(72h内,体温大于37.5度)且肺部影像学正常者,若外周血淋巴细胞绝对值小于0.8×109/L,或出现CD4及CD8 T细胞计数明显下降者,即使核酸检测未呈现阳性,均应居家隔离密切观察。病人常规检查中提到:1、筛查病例,就诊当日可酌情查炎症因子(IL-6,IL-10,TNF-α)、TB亚群11项.2、确诊病人序贯检查,第5-7天若有条件可复查TB淋巴细胞亚群11项。

  可以从诊疗指南中看到,免疫功能越来越受重视,尤其是临床治疗的过程中免疫功能状态的改变。仅仅做淋巴细胞亚群还不够,活化以及T细胞功能评价的指标也必不可少。

  正是因为免疫受到临床的重视,许多新冠病人的定点医院都开展了流式的检测。而我们的流式工作的老师,除了结果的准确及解读以外,也需要关注生物安全的防护。

  小贝整理了流式样本处理过程中一些注意事项,献给我们的流式工作者们。
01样本加样

  建议在生物安全柜进行实验操作,如有液体溅出,用浸湿75%酒精的纱布覆盖后擦拭。个人按照3级生物安全进行防护。

02溶血及固定

  根据卫生部2011年发布的《流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南》,尽量使用含固定剂的溶血素(如贝克曼库尔特的流式细胞分析用溶血剂PN: A11895,或可延长溶血时间至30min,加等量pbs混匀后上机),可以达到灭活病毒的作用。

  如采用贝克曼库尔特自动溶血仪器,可配套使用Beckman Coulter Immunoprep(PN: 7546946),程序运行结束后放置30min,可以达到灭活病毒的作用。

  如使用其他不带固定剂成分的溶血素(如氯化铵,或者贝克曼库尔特 Versalyse等, PN: A09777),也可以配制0.1%-2.0%的多聚甲醛或甲醛,或者稀释好的细胞保存液(PN:A07800)在溶血时一起加入,并且放置30min,可以达到灭活病毒的作用。

03混匀、离心等步骤防护

  灭活前的样品处理步骤,须严格按照三级防护,谨防气溶胶污染,例如:

  使用带生物安全密封盖或密封杯的离心机进行离心(如Beckman Coulter高速冷冻离心机配套的 AeroSolve透明密封杯系列,359232),样品管/流式管最好带密封盖离心,不使用自动脱帽离心功能;

  即使室温离心,也选用密封更良好的制冷型离心机(如Beckman Coulter Avanti J-15R,PN: B99515),并置于负压抽风区域;

  离心后静置10-30分钟再开盖,仔细观察样品无泄漏后,再把透明密封杯移至生物安全柜再开盖取样。


04仪器的清洗及维护

  如有样本的洒溢,请用浸湿75%酒精的纱布覆盖30min后擦拭,包括样本进样针。

  流式细胞仪的废液桶中需要装有占其体积 1/10的0.71mol/L次氯酸钠 (未稀 释的家用漂白剂)。 实验室设备应该用具有灭活传染源作用的溶液或新配制的 10%家用漂白剂消毒 ,尤其在设备维修和保养前给予严格消毒。

  流式工作者们请在确认防护安全的情况下进行实验,贝克曼库尔特的技术应用专家们时刻准备着做好支持工作,共克时艰!

涉及的产品信息及注册证号:
PN: A11895 流式细胞分析用溶血剂,备案号:国械备20170672号
PN: 7546946血细胞分析用溶血剂,备案号:国械备20170373号
PN: A07800 细胞保存液,备案号:国械备20140286
PN: B99515 高速冷冻离心机;备案号:国械备20171151号
PN: A09777. 血细胞分析用溶血剂国械备20140189号

参考资料:
1. 《北京协和医院关于“新型冠状病毒感染的肺炎”诊疗建议方案(V2.0)》
2. 2019新型冠状病毒相关实验室检测的生物安全指南(试行第一版)--中华医学会检验分会
http://www.cslm.org.cn/cn/news.asp?id=73.html&from=groupmessage&isappinstalled=0
3. 流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南--2011版卫生部行业标准(下载文件)

微信号:ayiwangapp17

(来源: 公众号 贝克曼库尔特生命科学 )

标签:新冠病毒肺炎,新冠病毒,肺炎病毒

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